适用于双向电泳的芒果叶片蛋白提取方法的建立
2016-01-14分类号：S667.7
【部门】广西农业科学院园艺研究所 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室 农业部南宁南亚热带果树科学观测实验站
【摘要】为建立一套适用于鉴别＂四季芒＂成花蛋白表达差异的双向电泳方法，摸索出合适的芒果叶片蛋白提取方案。以＂四季芒＂芒果叶片为材料，采用ＴＣＡ－丙酮法、酚抽提乙酸铵沉淀法、改良酚抽提乙酸铵沉淀法等３种芒果叶片蛋白提取方法，进行ＳＤＳＰＡＧＥ和双向电泳，比较这些方法的提取效果。结果表明，改良酚抽提乙酸铵沉淀法比一般酚抽提法获得更高质量的蛋白。对沉淀产物洗涤和干燥步骤的优化能有效提高ＴＣＡ－丙酮法蛋白提取质量。提取液Ｐ Ｈ能明显影响改良酚抽提乙酸铵沉淀法所提蛋白的得率、２－ＤＥ凝胶蛋白点数量和分布。Ｐ Ｈ ８．５提取液所提蛋白获得最多的２－ＤＥ蛋白点，但在小分子区域蛋白分辨率比Ｐ Ｈ９．０提取液所提蛋白低．．．
【关键词】芒果 蛋白提取 双向电泳 蛋白质组
【基金】广西自然科学基金项目(2012GXNSFBA053046); 广西农科院基本科研专项(桂农科2012YZ17;桂农科2013YF01); 国家现代农业产业技术体系广西杧果创新团队桂南综合试验站(桂农发[2011]33号)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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