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欧美杨脱水素PddHN2b的克隆与表达分析

2015-01-15分类号:S792.11

【作者】郭鹏  邢鑫  张万筠  姜健  
【部门】大连民族学院环境与资源学院  山东省威海市农业局  
【摘要】以欧美杨为材料,通过RT-PCR方法从欧美杨叶片中克隆到了抗旱脱水素DHN2b基因(命名为PDDHN2b),该基因开放阅读框为1440 bP,编码379个氨基酸,绝大多数氨基酸组成属于亲水性氨基酸,无明显跨膜结构域。亚细胞定位表明PDDHN2b基因定位在细胞质或细胞膜上。荧光定量PCR分析表明:该基因在顶端中表达量最高,功能叶、根和茎中则无表达。同时该基因受NaCl、aba和干旱等诱导表达。另外,构建了原核表达载体PETPDDHN2b,并在大肠杆菌bl21中表达融合蛋白,诱导纯化后免疫小白鼠,制备抗体。SDS-PaGE电泳结果表明,融合蛋白分子量为58ku。最后利用Ni-NTa纯化的PDDHN...
【关键词】欧美杨  PdDHN2b基因  克隆  表达  逆境
【基金】国家自然科学基金项目(31170168); 国家星火计划项目(2013GA651006); 国家火炬计划项目(2012GH531899); 中央高校自主科研基金项目(DC120101143;DC120140472); 博士启动基金项目(20120914)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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