玉米AGPAse-bt2与GPN1蛋白互作的双分子荧光互补技术研究
2015-05-11分类号：S513
【部门】吉林农业大学生命科学学院 吉林省农业科学院农业生物技术研究所 吉林大学生命科学学院
【摘要】【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ＡＤＰ－葡萄糖焦磷酸化酶（ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２）与糖酵解关键酶甘油醛－３－磷酸脱氢酶（ＧＰＮ１）在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２和ＧＰＮ１基因，然后采用双分子荧光互补技术（ｂｉＦＣ），构建３２６－ＣＹＣＨＡ－ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２和３２６－ＣＹＮｅｅ－ＧＰＮ１双分子荧光表达载体，转化农杆菌ｅＨＡ１０５，并用２种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞，４８Ｈ后在激光共聚焦显微镜下观察ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２与ＧＰＮ１的相互作用。【结果】ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２基因长１ ４２８ｂＰ，ＧＰＮ１基因长１ ４９７ｂＰ。双酶切鉴定结果表明，３２６－ＣＹＣＨＡ－．．．
【关键词】AGPase-bt2 GPN1 双分子荧光互补技术 蛋白质互作
【基金】国家自然科学基金项目(31170731,31200611); 吉林省科技发展计划项目(20130206012NY,20130102066JC)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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