马铃薯T-DNA插入拷贝数的检测及对农艺性状的影响研究
2015-12-15分类号:S532
【部门】青海大学农林科学院 青海省农林科学院/教育部青藏高原生物技术重点实验室/青海省高原作物种质资源与利用重点实验室
【摘要】以转基因马铃薯株系为材料,采用Real-time PCR方法,以SYBR GReen i为荧光染料,以马铃薯块茎贮藏蛋白基因(Patatin)作为内参基因,以植物表达载体上的潮霉素抗性基因(HPt)为筛选标记基因,建立目的基因Ct值与起始模版的相关性标准曲线,通过实时荧光定量PCR分别获得每个样品中内参基因和外源基因的Ct值,根据Pfaffl法计算获得了t-Dna在转基因马铃薯中的拷贝数,且与SoutHeRn Blot方法进行了比较,并结合田间农艺性状,分析了外源基因拷贝数马铃薯株高及薯块产量的影响。结果表明,内参基因和外源基因标准曲线的相关系数分别为R2=0.996、R2=0.995和R2=...
【关键词】马铃薯 实时荧光定量PCR 拷贝数 农艺性状
【基金】青海省科技厅专项资金(2013-Z-720); 现代农业产业技术体系专项资金(CARS-10)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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