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山定子(Malus baccata borkh.)根系蛋白质提取及双向电泳技术体系的建立

2015-10-15分类号:S661

【作者】李丽杰  苏宏  马怀宇  吕德国  
【部门】沈阳农业大学园艺学院/辽宁省果树品质发育与调控重点实验室  
【摘要】为开展山定子(Malus baccata borkh.)根系蛋白质组学研究,以当年生15片真叶的山定子实生苗白色幼嫩根系为试材,采用tca-丙酮沉淀法、酚抽提法和trizol抽提法3种方法提取其总蛋白质,并对样品上样量、iPG胶条的P h值范围和等电聚焦参数进行优化,建立适用于山定子根系的双向电泳技术体系。结果表明:采用trizol抽提法提取的蛋白质产率最高,可达3.15MG·G-1FW,且其sDs-PaGE图谱明显优于其他两种方法 ;选用800μG的上样量,17 cM P h值4~7的iPG胶条和改进后的等电聚焦程序所得到的二维电泳图谱蛋白点最多,最清晰,分辨率最高。
【关键词】山定子  根系  蛋白质  提取  双向电泳
【基金】“十二五”科技计划项目(2014BAD16B02-1); 国家现代苹果产业技术体系项目(CARS-28); 辽宁省农业科技攻关产业化项目(2014204004); 辽宁省高等学校果树栽培与生理生态创新团队项目(LT2014014)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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