【摘要】【目的】利用Ｒｅｄ／ｅＴ系统结合ＲｐｓＬ反向筛选建立苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＭＮｐＶ）晚期表达因子Ｌｅｆ－１０点突变载体，为进一步研究ＡｃＭＮｐＶＬｅｆ－１０的功能奠定基础。【方法】利用Ｒｅｄ／ｅＴ系统结合ＲｐｓＬ反向筛选ＢＡｃ修饰系统对ＡｃＭＮｐＶ Ｌｅｆ－１０进行点突变，由于Ｌｅｆ－１０和必需基因Ｖｐ１０５４有重叠，所以在敲除Ｌｅｆ－１０时只能通过引进点突变使Ｌｅｆ－１０失活，避免影响Ｖｐ１０５４的正常表达。首先，构建ＲｐｓＬ－ＡＭｐ筛选盒，然后在野生型ＡｃＢＡｃＭｉｄ中引进点突变（方法是通过２次Ｒｅｄ／ｅＴ重组：第１次重组在野生型ＡｃＢＡｃＭｉｄ Ｌｅｆ－１０中引进ＲｐｓＬ－ＡＭ．．．