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肌肉生成抑制素基因敲除猪多重PCR检测方法的建立

2015-11-30分类号:Q78

【作者】李晓琳  王勤  朱振营  吴绍强  仇松寅  刘晓飞  孙敏  潘登科  林祥梅  
【部门】中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所  山东出入境检验检疫局  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  
【摘要】[目的]本试验旨在建立肌肉生成抑制素基因(myostatin,mstn)敲除猪的快速检测方法,为该品系转基因猪及其产品的检测提供技术支持。[方法]根据猪β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,b2m)设计猪内源性基因引物,标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neomycin phosphotransferaseⅡ,nptⅡ)和测定的边界序列设计特异性引物,对引物的量进行调整,优化反应条件。对pcr的敏感性和特异性进行检测,并应用建立的方法对随机选取的32份猪肺和脾脏组织样品进行检测,均仅扩增出b2m条带。[结果]该方法的最佳退火温度为56℃,最低能检测出含1%mstn基因敲除基因组成分...
【关键词】转基因检测  多重PCR  MSTN基因敲除猪
【基金】转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08012-001); 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2011IK011)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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