中华绒螯蟹Δ9脂肪酸去饱和酶基因克隆与原核表达
2015-11-15分类号：S917.4
【部门】上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室
【摘要】根据中华绒螯蟹FAD9基因cDNA序列(Accession Number:JQ693685)设计引物,扩增得到中华绒螯蟹FAD9基因的开放阅读框(ORF),用原核表达载体p Cold-TF DNA成功构建重组表达载体p Cold-fad9,将p Cold-fad9转入大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S,在异丙-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下进行表达。SDS-PAGE分析表明,诱导后出现的特异性蛋白条带,大小与预期理论值(95.10 k D)相符。当IPTG浓度为0.3 mmol/L时,在15℃条件下诱导20 h,重组蛋白的表达量最高。目的蛋白主要存在于上清溶液中,为可溶性表达。利用...
【关键词】中华绒螯蟹 Δ9脂肪酸去饱和酶 克隆 原核表达
【基金】国家863发展划项目(2012AA10A409-5); 国家自然科学基金项目(31472287;31272677); 上海教委知识服务平台项目(ZF1206); 科技部港澳台科技合作专项(2014DFT30270); 上海市科委优秀学术带头人项目(12XD1402700)
【所属期刊栏目】中国水产科学
文献传递
