巨核酸酶I-SceI转基因元件的构建及其在斑马鱼中转基因效率的评估
2015-09-15分类号:S917.4
【部门】中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】巨核酸酶I-SceI是由酿酒酵母线粒体中核糖体大亚基上的Ⅰ型内含子编码的一种核酸内切酶,近年已被应用于转基因研究中。I-SceI介导的转基因大多是将I-SceI蛋白和带有其识别位点的质粒共注射于动物的受精卵,但注射酶蛋白前期处理耗时长且工作量大,直接用I-SceI的mR NA代替蛋白进行注射更为简捷。本研究应用I-SceI mR NA介导荧光蛋白基因在斑马鱼中的转植,进一步了解其转基因效率。首先设计合成带有巨核酸酶I-SceI编码序列的辅助质粒(pC S2-I-SceI),并分别构建了带有巨核酸酶I-SceI识别位点、EF1α启动子和荧光蛋白基因(eG FP/RFP)编码序列的供体质粒pI-S...
【关键词】巨核酸酶 I-SceI 斑马鱼 转基因
【基金】国家高技术研究发展计划(2011AA100404); 国家自然科学基金面上项目(31272688)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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