oleosin-MT融合蛋白在拟南芥中的表达及鉴定
2015-10-10分类号:Q943.2
【部门】吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心 吉林农业大学生命科学学院
【摘要】【目的】获得转金属硫蛋白(MT)基因的拟南芥植株,为利用植物生物反应器规模化生产MT奠定基础。【方法】利用融合PCR方法,扩增拟南芥MT基因与油体蛋白oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT。采用冻融法将质粒pOP-oleosin-MT转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化拟南芥,用PCR检测并筛选转基因拟南芥阳性植株,采用SDS-PAGE法检测oleosin-MT融合蛋白的表达,用邻苯三酚自氧化法和结晶紫法测定融合蛋白的体外抗氧化活性。【结果】成功构建了植物油体特异表达载体pOP-oleosin-MT,融合蛋白ole...
【关键词】金属硫蛋白 拟南芥 油体蛋白 基因表达
【基金】国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA100606); 国家自然科学基金项目(31201237,31101172); 吉林省科技厅中青年领军人才及优秀创新团队项目(20111815); 教育部博士点基金青年教师基金项目(20122223120002); 吉林省科技型中小企业创新基金项目(13C26212201223)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
文献传递