真核表达质粒pIRES-ST3GAL Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的初步表达
2015-11-20分类号:Q78
【部门】河南农业大学牧医工程学院 中国兽医药品监察所
【摘要】构建β半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶I(ST3GALI)基因的真核表达载体p IRES-ST3GALI,并诱导使其在大肠杆菌中高效表达。以p GEM-ST3GALI质粒为模板,采用PCR技术特异性扩增ST3GAL I基因,通过酶切和连接,构建真核表达载体p IRESST3GALI。经PCR、双酶切和测序鉴定正确后,转化筛选阳性重组大肠杆菌(DH5α),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,并用12%SDS-PAGE鉴定。结果表明,重组质粒p IRES-ST3GAL I中的ST3GAL I序列与原鸡的ST3GAL I氨基酸序列同源性98.8%,与猪的同源性达53.5%,与...
【关键词】β半乳糖苷α-2 3-唾液酸转移酶I 基因克隆 原核表达
【基金】河南省科技创新人才计划项目(144100510011); 国家农业科技成果转化资金项目(2012GB2D000273)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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