秦川牛ADIG基因重组腺病毒过表达载体的构建与病毒包装
2015-06-30分类号：S823;Q78
【部门】西北农林科技大学动物科技学院 国家肉牛改良中心
【摘要】【目的】构建秦川牛ADIG基因的重组腺病毒载体,包装并扩繁病毒,为下一步研究该基因在脂肪细胞分化过程中的分子作用机制和相关信号通路奠定基础。【方法】根据NCBI收录的家牛ADIG基因(NM_001113720.1)mRNA序列设计引物,以秦川牛组织样提取的总RNA反转录而成的cDNA为模板,通过RT-PCR和PCR扩增获得目的基因,将其连接到pMD19-T Simple载体并测序。质粒提取纯化后通过BglⅡ与SalⅠ双酶切,然后胶回收酶切产物,将其连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上,构建重组穿梭质粒pAdTrack/CMV-ADIG。将pAdTrack/CMV-ADIG质粒用PmeⅠ酶...
【关键词】ADIG 腺病毒 同源重组 秦川牛
【基金】国家转基因重大专项(2013ZX08007-002); “十二五”国家“863”计划项目(2013AA102505); 国家现代农业(肉牛牦牛)产业体系专项(CARS-38); 国家自然科学基金项目(31272411); 陕西省科技统筹创新工程计划项目(2014KTZB02-02)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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