转Cry1Ac-w基因抗虫玉米的获得及分子鉴定
2015-10-28分类号:S513
【部门】河南省农业科学院粮食作物研究所
【摘要】为将改造合成的抗虫基因(Cry1Ac-w)导入玉米基因组,以玉米杂交组合PA×PB的胚性愈伤组织为外植体,用双丙氨磷作为抗性愈伤组织的筛选剂,通过农杆菌介导法获得了82个再生植株。经标记基因(bar)和目的基因(Cry1Ac-w)的PCR检测,其中19株为阳性,即为推断的转Cry1Ac-w基因抗虫玉米。对其中2株(w1和w2)进行目的基因单酶切的Southern杂交分析,发现w1和w2分别为单位点和双位点插入,这也进一步证实目的基因已经整合入玉米基因组中。用Bt-Cry1Ab/Ac金标免疫试纸条进行蛋白质表达的检测,初步证实目标Cry1Ac-w蛋白在玉米中得到表达。
【关键词】玉米 农杆菌介导法 苏云金杆菌(Bt) Cry1Ac-w基因 Southern杂交 免疫检测
【基金】转基因生物新品种培育重大专项(2015ZX08011-003); 河南省农业科学院自主创新专项基金项目
【所属期刊栏目】华北农学报
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