利用多重RT-PCR检测水仙黄条病毒、水仙退化病毒和水仙花叶病毒
2015-09-18分类号:S436.8
【部门】福建农林大学植物病毒研究所 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心/福建省检验检疫技术研究重点实验室
【摘要】根据水仙黄条病毒、水仙退化病毒和水仙花叶病毒外壳蛋白(CP)基因的保守区序列设计3对特异性引物,通过优化包括Mg2+浓度、c DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度等在内的反应条件,建立了能同时检测这3种病毒的多重RT-PCR检测体系,并与单一RT-PCR做了比较.应用该体系能成功对3种病毒混合侵染的水仙样品进行多重RT-PCR扩增,获得751、623和483 bp 3条与预期大小相符的特异性条带,且RNA稀释至10-4倍时仍能被检测到.建立的多重RT-PCR检测体系具有良好的特异性和较高的灵敏度,比单一RT-PCR扩增更加方便、快速.
【关键词】水仙黄条病毒 水仙退化病毒 水仙花叶病毒 多重RT-PCR
【基金】福建省杰出青年科学基金资助项目(2014J06008); 国家质检总局科技计划项目(2013IK299;2013IK094); 质检公益性行业科研专项(201410076); 国家级星火计划项目(2012GA720018); 福州市科技计划项目(2013-N-54)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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