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草兔卵透明带3(ZP3)基因真核表达载体的构建与表达

2015-10-13分类号:Q78

【作者】吴景龙  隋丹丹  张冬辉  周智敏  李昊  郑雪莉  韩崇选  
【部门】西北农林科技大学林学院  
【摘要】【目的】利用基因重组技术将草兔卵透明带3基因(ZP3)构建到真核表达载体上,并在RK-13细胞中表达ZP3蛋白,为后期的免疫不育研究提供方便。【方法】提取草兔卵巢总RNA,采用RT-PCR方法克隆ZP3基因,将其与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1-ZP3表达载体,并将载体转入RK-13细胞中进行ZP3表达。利用倒置荧光显微镜、RT-PCR和Western Bolt方法对重组ZP3蛋白表达情况进行观测。【结果】RT-PCR获得长为1 260bp的草兔ZP3基因;成功构建pEGFP-N1-ZP3重组质粒,将其转染RK-13细胞后表达出73ku的重组ZP3蛋白,RT-PCR验证...
【关键词】草兔  卵透明带3基因  免疫不育  pEGFP-N1  真核表达
【基金】国家林业公益性行业专项(201404405); 西北农林科技大学基本科研业务费项目(QN2012036)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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