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山定子(MalusbaccataBorkh.)根系蛋白质提取及双向电泳技术体系的建立

2015-10-15分类号:S661

【作者】李丽杰  苏宏  马怀宇  吕德国  
【部门】沈阳农业大学园艺学院/辽宁省果树品质发育与调控重点实验室  
【摘要】为开展山定子(Malus baccata Borkh.)根系蛋白质组学研究,以当年生15片真叶的山定子实生苗白色幼嫩根系为试材,采用TCA-丙酮沉淀法、酚抽提法和Trizol抽提法3种方法提取其总蛋白质,并对样品上样量、IPG胶条的p H值范围和等电聚焦参数进行优化,建立适用于山定子根系的双向电泳技术体系。结果表明:采用Trizol抽提法提取的蛋白质产率最高,可达3.15mg·g-1FW,且其SDS-PAGE图谱明显优于其他两种方法 ;选用800μg的上样量,17 cm p H值4~7的IPG胶条和改进后的等电聚焦程序所得到的二维电泳图谱蛋白点最多,最清晰,分辨率最高。
【关键词】山定子  根系  蛋白质  提取  双向电泳
【基金】
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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