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牡蛎疱疹病毒魁蚶株交叉引物等温扩增检测方法的建立及初步应用

2015-04-15分类号:S944

【作者】赵小金  张盛静  白昌明  岳志芹  王崇明  尹伟力  蔡生力  黄倢  
【部门】上海海洋大学水产与生命学院  中国水产科学研究院黄海水产研究所  农业部海洋渔业可持续发展重点实验室  山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心  
【摘要】为建立牡蛎疱疹病毒魁蚶株快速、灵敏、准确和操作简便的检测方法,实验根据已测序完成的Os HV-1-SB全基因组序列,选择其保守区域,建立了交叉引物等温扩增检测方法,并对反应温度、d NTPs、Mg2+浓度和反应时间进行了优化。结果显示,最佳温度为63℃,反应时间为60 min,d NTPs浓度为1.4 mmol/L,Mg2+浓度为6 mmol/L。该方法检测灵敏度为30拷贝的质粒DNA,并且特异性较强,与贝类常见病原急性病毒性坏死病毒、鲍鱼疱疹病毒、派琴虫、包纳米虫、马尔泰虫以及对虾白斑综合征病毒和副溶血弧菌均无交叉反应。使用实验建立的CPA检测方法对2012年分别采自韩国庆尚南道、山东长岛、...
【关键词】魁蚶  牡蛎疱疹病毒魁蚶株  交叉引物等温扩增  检测
【基金】现代农业产业技术体系建设专项(CARS-48); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(20603022013025); 国家质检总局科研专项(2013IK040)
【所属期刊栏目】水产学报
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