半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)IGF-Ⅱ的体外重组表达
2015-08-25分类号：S917.4
【部门】农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛贝宝海洋科技有限公司 青岛市海洋与渔业局渔业技术推广站 绍兴市鸿港农业开发有限公司
【摘要】为在蛋白水平认识半滑舌鳎类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的生理功能,将IGF-Ⅱ成熟肽序列克隆到原核表达载体p ET-28a中,成功构建了重组半滑舌鳎IGF-Ⅱ/p ET28a质粒,导入到E.coli BL21(DE3)菌株后经IPTG诱导,获得了大小为11.4 k Da的重组IGF-Ⅱ蛋白,N端含6个组氨酸,可特异性地被6×His抗体识别。重组IGF-Ⅱ蛋白在最优诱导条件37℃诱导2 h,目的蛋白表达量占重组表达菌总蛋白的43.7%,重组蛋白主要以包涵体存在。将获得的重组蛋白包涵体经变性、纯化和复性后,获得了纯化的IGF-Ⅱ重组蛋白,其可在体外显著促进人乳腺癌MDA231细胞的增殖,表明IG...
【关键词】半滑舌鳎 IGF-Ⅱ 原核表达 生物活性
【基金】鲆鲽类现代产业技术体系(CARS-50); 山东省自然科学基金项目(ZR2012CQ025); 中央级公益性事业单位基本科研业务费项目(20603022012022); 绍兴市院校科技合作项目(2012704)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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