绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达
2015-03-15分类号:S858.26
【部门】西北民族大学生命科学与工程学院
【摘要】通过计算机软件筛选出绵羊痘病毒基因组中心编码区的ORF90核蛋白、ORF112融合蛋白、ORF117糖蛋白、ORF55膜蛋白和基因组末端的ORF134宿主范围相关基因的6段T、B细胞优势抗原表位,以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头,串联合成1条全新的多表位嵌合基因mE,将其克隆到原核表达载体pET-32中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pET32-mE质粒;用IPTG在不同条件下诱导表达,确定最佳表达条件,表达产物经SDS-PAGE分析。结果表明,重组蛋白是分子质量为41ku的融合蛋白。在IPTG浓度为0.5mmol/L,温度为37℃、诱导4h时目的蛋白的表达量最大,约占...
【关键词】绵羊痘病毒 抗原表位 多表位 嵌合基因 原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(31260609;31360533); 西北民族大学中央高校基本科研业务费专项(ZYZ2012072)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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