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H3N2亚型SIV核蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

2015-01-19分类号:S852.65

【作者】朱春平  李燕  吴亚丽  常婧竹  刘琳  高文明  李新生  
【部门】河南农业大学牧医工程学院  中国兽医药品监察所  
【摘要】【目的】克隆和表达H3N2型猪流感病毒(SIV)A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的核蛋白(NP)基因,为制备NP抗体和SIV基因工程疫苗奠定基础。【方法】提取SIV A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的RNA,用RT-PCR扩增NP基因,将其定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体,构建重组表达载体,并将其转化入大肠杆菌Rosetta中表达,用SDS-PAGE和Western blotting检测表达产物,同时考察IPTG不同浓度(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mmol/L)和不同诱导时间(2,4,6,8h)对重组NP蛋白表达量的影响。【结果】克...
【关键词】猪流感病毒  核蛋白  H3N2亚型  大肠杆菌
【基金】国家农业科技成果转化资金项目(2012GB2D000273); 河南省科技成果转化计划项目(122201110027)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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