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钩栗 ISSR-PCR 反应体系的建立与优化

2015-04-25分类号:

【作者】田艳伶  李志辉  杨模华  张斌
【部门】(中南林业科技大学 林学院  湖南 长沙 410004)
【摘要】摘 要:本研究以钩栗叶片为实验材料,采用单因素和 L16(45) 正交实验探讨了 DNA 模板用量、Mg2+浓度、引物用量、Taq DNA 聚合酶、dNTP 用量以及不同退火温度对钩栗 ISSR-PCR 扩增的影响,建立了钩栗 ISSR-PCR反应体系。研究结果显示,优化后的最佳反应体系为,20 μL 反应总体系中,含 30 ng 模板 DNA,3 mmol/LMg2+,0.4 mmol/L dNTPs,0.75 U Taq DNA 聚合酶,0.3 μmol/L 引物;对钩栗 DNA 样品材料进行 ISSR-PCR 扩增体系的检测结果显示,该优化体系扩增的产物条带清晰,稳定性高,本研究为钩栗种...
【关键词】关键词:钩栗  ISSR-PCR  正交设计  单因素试验  优化
【基金】
【所属期刊栏目】中南林业科技大学学报
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