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黄瓜叶片细胞壁蛋白质提取方法的筛选

2015-02-15分类号:S642.2

【作者】孟祥南  张迪  范海延  于洋  崔娜  宋铁峰  
【部门】沈阳农业大学生物科学技术学院  沈阳农业大学设施园艺省部共建教育部重点实验室  辽宁省农业科学院蔬菜研究所  
【摘要】以黄瓜幼苗的叶片为材料,分别采用酚提取法、盐提法、尿素提取法和真空渗透提取法分离细胞壁蛋白,比较不同提取方法的提取效果,以期为黄瓜细胞壁蛋白质组学研究的开展奠定基础。结果表明:盐提法的蛋白产率最高,尿素提取法次之,真空渗透提取法和酚提取法的蛋白产率较低;采用六磷酸葡萄糖脱氢酶活性测定法检测细胞质蛋白的污染率,其中,真空渗透提取法获得的细胞壁蛋白污染率最低(1.07%),其次为盐提法(2.17%),而酚提法和尿素提取法的污染率分别高达25.90%和2.60%;SDSPAGE电泳分析表明盐提法的蛋白条带清晰,且细胞质中高丰度蛋白Rubisco的条带不明显。
【关键词】黄瓜叶片  细胞壁蛋白质  提取  SDS-PAGE
【基金】高校杰出青年学者成长计划项目(LJQ2011068)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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