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农杆菌介导的ACO反义基因对铁皮石斛的遗传转化

2015-04-28分类号:S567.239

【作者】武荣花  康莹莹  王洁琼  刘佳  崔波  蒋素华  张开明  
【部门】河南农业大学林学院  河南农业大学生命科学学院  郑州师范学院生物工程研究所  
【摘要】以铁皮石斛原球茎为受体,用农杆菌介导1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)的反义基因对铁皮石斛进行遗传转化,并对影响转化的几个因素进行优化,结果表明:经刀切法处理的原球茎,在AS浓度为100μmol/L、农杆菌菌液OD600值为0.8的条件下侵染30 min,共培养60 h,接种到含有30 mg/L Mer和3.0 mg/L PPT的筛选培养基中,遗传转化效率最高。筛选获得的抗性植株经GUS组织化学染色和PCR鉴定,初步证明ACO反义基因已整合到铁皮石斛的基因组中。
【关键词】铁皮石斛  ACC氧化酶  遗传转化  根癌农杆菌
【基金】国家自然科学基金项目(31101562); 河南省高等学校重点科研项目(15A220006)
【所属期刊栏目】华北农学报
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