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传染性造血器官坏死病毒抗原表位富集区的原核表达及应用

2015-03-15分类号:S941

【作者】陶健  徐黎明  刘淼  赵景壮  曹永生  卢彤岩  尹家胜  刘红柏  
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所  
【摘要】以传染性造血器官坏死病毒Sn1203株(IHNV-Sn1203)基因组RNA提取物为模板,利用生物信息学软件分析,通过RT-PCR一步法扩增截短的G蛋白基因序列(约375 bp),将其克隆到表达载体p ET-27b中,构建重组表达质粒p ET-27b-IHNV-short G,通过大肠杆菌Rosetta表达菌株获得高效表达。在IPTG浓度为0.25 mmol/L时,37℃诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析显示目的蛋白相对分子质量约为14 000,符合预期大小,并以包涵体的形式表达,4 h时目的蛋白表达量最大。蛋白经变性、复性处理后获得不带任何标签的纯化蛋白,并利用该蛋白制备兔抗血清。ELIS...
【关键词】传染性造血器官坏死病毒  G蛋白  原核表达  抗血清
【基金】农业公益性行业科研专项经费项目(201003055-17); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(HSY201410); 黑龙江省冷水性鱼类种质资源及增养殖重点开放实验室(2014A06XK06)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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