星突江鲽胰岛素样生长因子II的原核表达与生物活性分析
2015-03-15分类号：S917.4
【部门】农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】根据鲽形目和鲈形目鱼类的IGF-II基因保守序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术克隆得到编码星突江鲽(Platichthys stellatus)IGF-II成熟肽的全长c DNA序列(210 bp),同源性分析显示IGF-II成熟肽在B、A和D区高度保守。利用原核表达载体p ET-28a构建了重组表达质粒(IGF-II/p ET28a),转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导,获得了N端含6个组氨酸的重组蛋白。37℃条件下用1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h,目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的42.7%。重组蛋白主要以包涵体形式存在,经SDS-PAGE电泳检测,IGF-II...
【关键词】星突江鲽 IGF-II 原核表达 生物活性
【基金】国家863计划项目(2012AA10A413); 鲆鲽类现代产业技术体系(CARS-50); 中央级公益性事业单位基本科研业务费项目(20603022012022); 山东省自然科学基金项目(ZR2012CQ025)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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