罗非鱼HSP70(tHSP70)蛋白的生物信息学分析、真核表达及质谱鉴定
2015-05-15分类号:S917.4
【部门】广西水产科学研究院 广西大学动物科学技术学院
【摘要】运用生物信息学技术分析罗非鱼热休克蛋白70(tilapia heat shock protein,t HSP70)的理化特性、糖基化位点、跨膜区域、蛋白的细胞定位及信号肽与虹鳟等其他动物HSP70的相似性,以人工合成c DNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增其完整CDS,并将此DNA片段与真核表达载体p GAPZa-A连接,构建p GAPZa-HSP70表达质粒,在毕赤酵母GS115中表达t HSP70蛋白,对表达上清液进行SDS-PAGE及Western-blotting分析后,采用Ni2+IDA层析脱盐纯化目的蛋白,并对所表达的蛋白进行糖基化PAS染色鉴定。对表达的蛋白进行SDS-PAGE后...
【关键词】罗非鱼热休克蛋白70 真核表达 糖基化 质谱鉴定
【基金】国家自然科学基金面上项目(31372553); 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-49); 广西八桂学者建设工程专项
【所属期刊栏目】水产学报
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