NS1基因主要抗原区的可溶性表达及其Dot-ELISA检测方法的建立
2015-05-11分类号：S852.651
【部门】河南科技学院动物科学学院 动物疫病和残留物防控河南省高校工程技术研究中心 滑县动物卫生监督所
【摘要】【目的】可溶性表达猪流感病毒(SIV)NS1基因主要抗原区(NS1′)蛋白,获得具有良好抗原性的NS1′蛋白,并初步建立检测NS1抗体的斑点酶联吸附试验(Dot-ELISA)方法,为鉴别诊断猪流感病毒感染猪与疫苗免疫猪奠定基础。【方法】以质粒pET28a-NS1为模板,PCR扩增NS1基因抗原性较好的区段NS1′,用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后插入pET-32a(+),构建pET32a-NS1′,经PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定后,转化大肠杆菌Rosetta,用IPTG诱导表达,纯化NS1′并免疫家兔制备多克隆血清,对其进行SDS-PAGE、Western blotting...
【关键词】猪流感病毒 非结构蛋白1 主要抗原区域 可溶性表达 斑点酶联免疫吸附试验
【基金】河南省基础与前沿技术项目(122300410135); 河南省教育厅自然科学研究项目(2011A230008)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
文献传递
