水稻种子样品前处理对转基因成分荧光PCR检测的影响
2015-01-18分类号:S511
【部门】福建省种子管理总站 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 厦门塔斯曼生物工程公司
【摘要】以转基因水稻科丰6号不同含量的水稻种子为样品,对影响检测结果的主要前处理措施,包括样品研磨颗粒细度与DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液温育时间等,进行分析筛选.结果表明,样品颗粒细度与CTAB缓冲液温育时间的不同处理组合对提取的DNA含量影响极显著,其中,样品颗粒细度>100目与CTAB缓冲液温育时间>8 h(过夜)处理的样品DNA提取效果与荧光PCR检测结果均最佳.采用最佳前处理组合,样品的主要转基因成分(Ca MV 35S、NOS、Cry1Ab)检出限从通常的转基因含量质量分数0.01%降到0.001%,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测灵敏度提高10倍,大幅度提高了检测结果的准确性...
【关键词】水稻种子 转基因成分 实时荧光PCR 检出限
【基金】福建出入境检验检疫局科技计划项目(FK2010-28;FK2013-02)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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