利用酵母双杂交系统筛选介体异沙叶蝉中与小麦矮缩病毒外壳蛋白互作的蛋白质
2015-06-17分类号：S435.12
【部门】中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室
【摘要】【目的】利用分离泛素酵母双杂交膜系统(split-ubiquitin yeast membrane system),以小麦矮缩病毒(Wheat dwarf virus,WDV)的外壳蛋白(CP)基因为诱饵对异沙叶蝉(Psammotettix alienus L.)c DNA文库进行筛选,研究异沙叶蝉传播WDV的分子机制。【方法】以笔者实验室饲养的异沙叶蝉为材料,提取其总RNA后取100 ng进行纯化,利用SMART法反转录合成ds c DNA,经过Sfi I酶切纯化,连接到p PR3-N文库载体上,构建得到以p PR3-N为载体的异沙叶蝉分离泛素酵母双杂交膜系统c DNA文库。同时,构建带有S...
【关键词】异沙叶蝉 小麦矮缩病毒 SMART技术 cDNA文库 分离泛素酵母双杂膜系统
【基金】国家自然科学基金(31272017); 国家公益性行业(农业)科研专项(201303021)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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