番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备
2015-02-28分类号：S432.41
【部门】云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室 云南省农业科学院高山经济植物研究所
【摘要】用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体p ET-30 a中,获得原核表达载体p ET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57k Da融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192。用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功...
【关键词】番茄环纹斑点病毒 非结构蛋白 原核表达 抗血清 检测
【基金】973计划前期研究专项(2010CB134501); 国家自然科学基金(31060237)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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