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拟南芥IAA7的原核表达及稳定性分析

2015-04-25分类号:Q943.2

【作者】刘会珍  罗为桂  谢伟民  胡月清  苏益  萧浪涛  蔺万煌  
【部门】湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室  
【摘要】以p GEX–KG为基本骨架,构建了拟南芥IAA7蛋白的原核表达载体,用IPTG诱导IAA7在3种大肠杆菌表达菌株Rosetta、BL21和Tuner中表达,利用GST SefiroseTM resin亲和树脂分离纯化GST–IAA7融合蛋白,并分析重组蛋白在体外保存时的稳定性。结果表明:GST–IAA7融合蛋白在Rosetta菌株中于25℃和0.4 mmol/L IPTG诱导下表达较好;蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著延长GST–IAA7在体外保存的时间,最后利用凝血酶切除GST标签后获得了纯化的IAA7蛋白质。
【关键词】IAA7蛋白  原核表达  GST标签  蛋白质纯化
【基金】国家自然科学基金项目(91317312); 湖南省高校创新平台开放基金项目(11K032,13K065)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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