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重组大肠埃希菌外膜蛋白OmpT的载体构建和表达条件优化及多克隆抗体制备

2015-08-25分类号:Q936

【作者】刘祥  俱雄  陈春琳  
【部门】陕西理工学院生物科学与工程学院  
【摘要】通过分子克隆,获得了Omp T蛋白的表达菌株;利用切胶纯化,获得了Omp T蛋白。用Omp T蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶1 600,用Western Blotting法检测抗血清特异性较好。采用正交试验,获得Omp T菌株的适宜表达条件为诱导菌液OD600 nm为1.0,IPTG添加终浓度为0.3 mmol/L,诱导时间为8 h,诱导温度32℃;适宜培养条件为葡萄糖质量分数0%,转速230 r/min,装液量50 m L。
【关键词】大肠埃希菌  外膜蛋白Omp T  多克隆抗体
【基金】陕西省教育厅科学研究计划项目(2013JK0723); 陕西理工学院人才启动项目(SLGQD13–15)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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