不结球白菜Pol胞质雄性不育花酵母双杂交cDNA文库的构建及筛选
2014-10-17分类号:S634.3
【部门】南京农业大学园艺学院
【摘要】[目的]构建不结球白菜Pol胞质雄性不育花酵母双杂交cDNA文库,筛选与细胞色素C还原酶铁硫蛋白(BcRISP1)互作的蛋白。[方法]从不结球白菜Pol胞质雄性不育花中提取总RNA,通过长距离PCR,扩增双链cDNA(ds cDNA)。采用SMART建库技术构建不结球白菜Pol胞质雄性不育花全长cDNA文库。利用BcRISP1基因的开放阅读框,构建诱饵表达载体pGBK T-7-BcRISP1转化AH109酵母菌,根据酵母双杂交技术筛选出与BcRISP1互作的片段,并进行质粒共转化验证。[结果]经检测,文库的转化率为每μg p GADT7-Rec 1.80×106转化子,文库滴度为1.21×10...
【关键词】不结球白菜 Pol胞质雄性不育(Pol CMS) 酵母双杂交
【基金】国家863计划项目(2012AA100202); 南京农业大学青年科技创新基金(KJ2013015)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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