大豆茎褐腐病菌环介导等温扩增检测技术的建立
2015-05-25分类号：S435.651
【部门】南京农业大学植物保护学院卵菌与真菌分子生物学实验室 江苏出入境检验检疫局
【摘要】[目的]应用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立基于颜色判定的简便、快速和灵敏的大豆茎褐腐病菌[Phialophora gregata f.sp.sojae(PGS)]检测方法。[方法]利用LAMP技术,以ITS为靶序列,设计了4条特异性的LAMP引物和2条环引物,在此基础上建立了检测大豆茎褐腐病菌的LAMP体系。[结果]整个检测过程仅需1 h就可通过肉眼直接目测试验结果。在等温条件下(64℃)进行核酸扩增反应1 h,在扩增前加入染料HNB(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂,根据HNB的颜色变化可以判断PGS的存在与否。...
【关键词】大豆茎褐腐病菌 环介导等温扩增 ITS 羟基萘酚蓝(HNB)
【基金】国家863计划项目(2012AA101501); 国家质检总局项目(2012IK278)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递
