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拟南芥抗病相关基因T1N6_22的原核表达分析

2015-02-28分类号:Q943.2

【作者】蒋琛茜  瓮巧云  樊锦涛  王冠宇  董丽萍  邢继红  董金皋  
【部门】河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室  河北北方学院农林科技学院  
【摘要】为构建拟南芥抗病相关T1N6_22基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的T1N6_22蛋白,以拟南芥Col-0的c DNA为模板,扩增获得了T1N6_22基因CDS,对其进行克隆、测序后与含有GST标签蛋白的p GEX4T-1载体相连,构建T1N6_22的原核表达载体p GEX4T-1-T1N6_22-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的载体及空载体转化大肠杆菌BL21。结果表明,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与标签蛋白融合的T1N6_22蛋白,大小约57 k Da。SDS-PAGE分析表明,高效表达的诱导条件为0.1 mmol/L IPTG诱导培养3 h。研究结果为进一步T1...
【关键词】拟南芥  T1N6_22  原核表达  纯化
【基金】国家自然科学基金项目(31200203); 河北省自然科学基金项目(C2012204032;C2014405010); 高等学校博士学科点专项科研基金项目(20121302120007)
【所属期刊栏目】华北农学报
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