多转座子载体的构建及转座特性比较研究
2015-06-01分类号:Q78
【部门】扬州大学动物科学与技术学院
【摘要】【目的】转座子(transposon,Tn)是染色体上可自主复制和移位的基本单位,普遍存在生物体基因组内,Sleeping beauty(SB)、piggy Bac(PB)和Tol2分别来源于鲑鱼、甘蓝尺蠖蛾和青鳉鱼,是目前脊椎动物中活性较高的转座子。比较了这3种转座子在哺乳动物细胞的转染、插入和剪切效率,从而获得细胞水平上的高活性转座子系统。【方法】通过高保真PCR法分别从SB、PB和Tol23种转座子载体克隆3种转座子3′和5′端的转座元件,测序正确后,将各转座元件依次亚克隆至p T2-HB载体框架,构建成包含这3种转座子的多转座子载体pT3-PST。将绿色荧光蛋白表达框CAG-GFP和新...
【关键词】SB转座子 PB转座子 Tol2转座子 胚胎成纤维细胞 转座活性
【基金】国家自然科学基金(31200920); 国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2013ZX08006-005); 中国博士后科学基金特别资助项目(201104168); 江苏省产学研联合创新资金项目(SBY201320109)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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