传染性鲑鱼贫血症病毒实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立
2014-08-15分类号:S943
【部门】深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
【摘要】根据ISAV的基因保守序列,利用LAMP Designer软件设计了6条引物,采用新型的环介导等温扩增设备进行扩增和检测,优化了反应条件,分析了所建立方法的特异性和灵敏度,并与RT-PCR和实时荧光RT-PCR进行比较。研究表明,该方法最适反应温度为64℃,反应10 min就可以观察到明显的扩增。该方法灵敏度高,检测限为78.4 fg RNA,比常规RT-PCR灵敏度高100倍,与实时荧光定量RT-PCR灵敏度相当;特异性好,与传染性胰腺坏死病毒(IPNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、出血性败血症病毒(VHSV)、鱼类病毒性神经坏死病病毒(VNNV)、鱼腹水病毒(YAV)等14种主要鱼类病...
【关键词】传染性鲑鱼贫血症病毒 实时荧光环介导等温扩增 检测
【基金】国家质量监督检验检疫总局科研项目(2011IK014)资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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