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草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10编码蛋白多克隆抗体制备及其特性分析

2014-03-15分类号:S943

【作者】李永刚  曾伟伟  王庆  殷亮  王英英  梁红茹  刘春  石存斌  吴淑勤  
【部门】中国水产科学研究院珠江水产研究所  农业部渔药创制重点实验室  上海海洋大学水产与生命学院  
【摘要】为研究草鱼呼肠孤病毒(GCRV)HZ08株S10基因节段编码蛋白的可能功能,采用PCR方法扩增草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10基因节段,并把该基因节段克隆至表达载体pET-32a(+),获得的重组表达载体pET-32a-S10转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE分析鉴定后,再通过变性、过Ni柱纯化、透析复性纯化获得目的蛋白。然后用纯化的重组蛋白免疫昆明小白鼠,制得多克隆抗体,用间接ELISA方法测定抗体效价,用Western blot和IFA(间接免疫荧光试验)鉴定抗体特异性。结果表明,SDS-PAGE分析表达的重组蛋白约为53 ku,大小与预期...
【关键词】草鱼呼肠孤病毒  HZ08株  S10编码蛋白  多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金项目(31202026); 国家科技支撑计划(2012BAD25B02); 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46)
【所属期刊栏目】水产学报
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