基于gyrB基因的SYBR Green I实时定量PCR检测病原灿烂弧菌
2014-06-15分类号:S941.4
【部门】中国海洋大学水产学院 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所
【摘要】灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大。本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测灿烂弧菌的方法。构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green I实时定量PCR,在Tm为62℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.338x+37.67,相关系数为0.999,扩增效率为0.99,最低能检测到20个拷贝。实验结果表明,该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对灿烂弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。
【关键词】gyrB基因 灿烂弧菌 实时定量PCR SYBR Green I
【基金】十二五863项目(2012AA10A412-4); 科研院所技术开发研究专项项目(2011EG34219); 国家科技支撑计划课题(2012BAD17B03); 国家自然科学基金项目(30901120;31202016); 青岛市战略性新兴产业培育计划项目(13-4-1-65-hy)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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