基于vhhP2基因的SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌方法的建立
2014-05-15分类号：S941
【部门】中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 山东省出入境检验检疫局
【摘要】根据哈维氏弧菌(Vibro harveyi)溶血素基因vhhP2的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌的方法。构建含vhhP2基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green I实时定量PCR,在Tm为60℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个特异峰,扩增所得标准曲线为y=–3.331x+37.48,相关系数为0.998,扩增效率为1,最低可检测到7个拷贝。实验结果表明该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对哈维氏弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。
【关键词】vhhP2基因 哈维氏弧菌 实时定量PCR SYBR Green I
【基金】国家863计划项目(2012AA10A412-4); 国家科技支撑计划项目(2012BAD17B03); 国家自然科学基金项目(31202-016); 科研院所技术开发研究专项项目(2011EG34219); 青岛市战略性新兴产业培育计划项目(13-4-1-65-hy); 山东省优秀中青年科学家奖励基金项目(BS2010SW035)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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