豆状带绦虫TPO18基因的原核表达及保护性分析
2014-07-25分类号:S858.291
【部门】甘肃农业大学动物医学院
【摘要】【目的】明确重组蛋白pGEX-TPO18的免疫保护效果。【方法】提取豆状带绦虫六钩蚴RNA,根据带科其他种属绦虫18 kD基因的保守区设计引物,5′端分别引入EcoR I、Xho I限制性酶切位点,RT-PCR扩增,产物克隆于pMD18-T中进行序列测定,并对序列进行生物信息学分析。将纯化后的PCR产物和质粒pGEX-4T-1分别用EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切,回收目的片段,连接后转化至E.coli BL21感受态细胞,挑斑摇菌,通过PCR方法和重组质粒测序技术进行鉴定,将鉴定正确的重组表达质粒命名为pGEX-TPO18。用IPTG诱导表达重组质粒,收集菌体进行SDS-PAGE分析,用GST琼脂...
【关键词】豆状带绦虫 TPO18 原核表达 免疫保护性分析
【基金】甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW-2010-01); 甘肃省科技支撑计划项目(1104NKCA082)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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