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鉴别猪伪狂犬病病毒强毒与疫苗毒双重PCR检测方法的建立

2014-04-28分类号:S852.651

【作者】顾阳  高晓云  程琨  潘鑫龙  崔保安  陈红英  
【部门】河南农业大学牧医工程学院  河南农业大学生命科学学院  
【摘要】根据猪伪狂犬病病毒(PRV)gE、gH基因序列,设计合成了2对特异性引物,分别建立gE和gH基因的单项PCR扩增方法。通过对PCR扩增条件的优化,建立了鉴别PRV强毒和疫苗毒的双重PCR检测方法,即利用一次PCR反应,从强毒株基因组中可同时扩增出2条大小分别为429 bp(gE基因)、355 bp(gH基因)的特异性片段,从弱毒株DNA中仅扩增出1条大小为355 bp的片段,而猪圆环病毒2型和猪细小病毒DNA扩增结果均为阴性。敏感性试验表明,所建立的双重PCR检测方法最低有效检测量为1×102TCID50/0.1 mL。该方法适合对PRV强毒和疫苗毒的快速鉴别诊断。
【关键词】伪狂犬病毒  双重PCR  检测  强毒株  疫苗株
【基金】河南省重大科技项目(111100110300)
【所属期刊栏目】华北农学报
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