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禽腺联病毒Rep基因在昆虫细胞中的表达

2014-03-30分类号:S852.65

【作者】朱善元  王安平  吴双  王永娟  左伟勇  洪伟鸣  
【部门】江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室  
【摘要】根据禽腺联病毒Rep基因序列设计2对引物,分别扩增出Rep78和Rep52基因,将其克隆至杆状病毒双表达载体pFastBacDual,获得重组穿梭质粒pFastBacDual-Rep,将其转化到E.coli DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组病毒表达质粒rBacmid-Rep。在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBac-Rep。SDS-PAGE结果分析表明,Rep78、Rep52均获得了表达,Western blot结果显示表达的重组蛋白能够与Rep52多抗反应,具有良好的反应原性。结论:禽腺联病毒的非结构蛋白Rep78、Rep52基因在昆虫细胞中获得了...
【关键词】禽腺联病毒  Rep基因  昆虫细胞  表达
【基金】江苏省自然科学基金项目(BK2011536); 国家自然科学基金项目(31302096)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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