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应用半乳糖表型差异高效筛选α-1;3半乳糖苷转移酶基因缺失的猪成纤维细胞

2013-12-24分类号:S828

【作者】岳成鹤  曹随忠  李西睿  冯冲  龙川  余树民  储明星  潘登科  
【部门】四川农业大学动物医学院  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  
【摘要】【目的】筛选α-1,3半乳糖苷转移酶(α1,3galactosyl transferase,GGTA1)基因缺失的猪成纤维细胞。【方法】用同源重组载体pBS-GGTA1-SKO和pBS-GGTA1-DKO电转染GGTA1单等位基因敲除(GGTA1+/-)的五指山小型猪胎儿成纤维细胞,利用磁激活细胞分选(MACS)、MACS联合流式细胞术(FACS)、TcdA联合FACS等3种方法进行细胞筛选;对MACS筛选获得的单细胞克隆进行PCR和FACS鉴定,对MACS联合FACS、TcdA联合FACS获得的细胞集落进行PCR鉴定。【结果】经MACS筛选获得了11个细胞克隆,经鉴定2个是GGTA1-/-细...
【关键词】五指山小型猪  基因缺失  GGTA1基因  成纤维细胞
【基金】农业部转基因动物新材料的育种价值评估项目(2011ZX08010-006); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2012yq-2)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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