玉米APX基因的克隆及其原核表达研究
2014-08-28分类号：S513;Q943.2
【部门】青岛农业大学生命科学学院 青岛农业大学青岛市主要农作物种质创新与应用重点实验室 青岛农业大学农学与植物保护学院
【摘要】为了研究冷胁迫处理下的玉米抗坏血酸过氧化物酶的作用,根据GenBank发表的APX基因的ORF序列设计引物,利用RT-PCR从冷胁迫后的玉米自交系(E28)叶片总RNA中经cDNA转化,pMD19-T载体的亚克隆,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基。生物信息学分析显示,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.3 kDa和5.56。将携带完整的ORF序列连入表达载体pET-28a(+)中,APX基因经IPTG诱导后高效表达,SDS-PAGE电泳检测到目标蛋白的大小约为27.3 kDa,与预测结果一致。抗盐分析显示,重组大肠杆菌BL21(pET28-APX)的抗...
【关键词】APX 原核表达 pET28a(+) IPTG BL21(DE3)
【基金】青岛市公共领域科技支撑计划项目(12-1-3-15-nsh); 国家自然科学基金项目(31371636); 山东省农业生物资源创新利用研究课题项目; 山东省现代农业产业技术体系玉米产业创新团队项目(SDAIT-01-022-01)
【所属期刊栏目】华北农学报
文献传递
