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快速检测黄瓜细菌性角斑病菌的间接ELISA法优化

2014-04-15分类号:S436.421.1

【作者】孙艳秋  赵奎华  刘长远  曹远银  
【部门】沈阳农业大学植物保护学院  辽宁省农业科学院植物保护研究所  
【摘要】采用黄瓜细菌性角斑病菌作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立较优黄瓜细菌性角斑病菌间接酶联免疫吸附分析(ELISA)检测方法。通过对抗原包被浓度和抗体稀释浓度、封闭液和封闭时间、抗体温育时间等的优化,确定ELISA法最低检测限。结果表明:抗原的较优包被浓度为106cfu·mL-1,抗体的较优工作浓度为1∶4000,以5%胎牛血清作为封闭液,在37℃下封闭1.5h,加入抗体温育1.5h是间接ELISA法的较优反应条件,方法的检测限为105cfu·mL-1。对田间采集的病叶进行检测表明,该方法可准确检测出黄瓜细菌性角斑病菌,可用于田间黄瓜细菌性角斑病的快速诊断。
【关键词】黄瓜细菌性角斑病菌  酶联免疫吸附分析  抗体  抗原浓度  封闭液
【基金】辽宁省农业科学院博士后项目(200703); 辽宁省教育厅科学研究一般项目(L2012245)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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