对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP110部分重组表达及其与对虾鳃细胞膜蛋白结合分析
2014-04-15分类号:S945.46
【部门】农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所 上海海洋大学
【摘要】将VP110基因的部分序列克隆到pET-28a载体中构建pET28a-vp110b重组质粒并进行原核表达,获得重组表达的蛋白rVP110-B;用rVP110-B注射凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei后,经WSSV感染,实验表明,该蛋白注射使凡纳滨对虾感染WSSV的半数死亡时间比对照组延长了20%。用表达纯化的该重组蛋白制备了兔抗rVP110-B多克隆抗体,该抗体用于凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白与rVP110-B的Far-western分析显示,凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白中除90 kDa左右的血蓝蛋白外,在41.7 kDa存在结合条带,经质谱分析表明这条鳃细胞膜蛋白是肌动蛋白。
【关键词】WSSV VP110 原核表达 凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白 Far-western
【基金】公益性行业(农业)科研专项经费(201103034); 现代农业产业技术体系(CARS-47);中国水产科学研究院黄海水产研究所级基本科研业务费(20603022013009); “泰山学者”建设工程专项经费; 农业科研杰出人才培养计划项目共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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