对虾6种病毒多重PCR检测方法的建立
2014-02-15分类号:S945.1
【部门】中国海洋大学海洋生命学院 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所
【摘要】本研究针对养殖对虾6种病毒,包括白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、肝胰腺细小病毒(HPV)、桃拉综合征病毒(TSV)、对虾杆状病毒(BP)和传染性肌肉坏死病毒(IMNV),选择各自的基因分别设计特异性引物和探针,首先进行了单一病毒的PCR验证,在此基础上建立了同时特异性检测6种对虾病毒的多重PCR检测体系。对反应条件进行优化并进行特异性和灵敏度的验证。50μl反应体系,Mg2+的最佳浓度为5mmol/L,ExTaq酶最佳用量为3.75U,反应程序中最佳退火温度为55.5℃。6种病毒之间以及与对虾基因组都存在很好的特异性。最终经试验验证,该系统的检测灵敏度对...
【关键词】WSSV IHHNV HPV TSV BP IMNV 多重PCR
【基金】公益性行业(农业)科研专项经费(201103034); 现代农业产业技术体系(CARS-47); 中国水产科学研究院基本科研业务费(2012A05)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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