杂交鳢(斑鳢♀×乌鳢♂)弹状病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
2014-01-15分类号:S941
【部门】中国水产科学研究院珠江水产研究所 农业部渔药创制重点实验室 广东省水产动物免疫技术重点实验室
【摘要】为了建立一种能在临床上快速、准确检测杂交鳢弹状病毒(HSHRV)的TaqMan实时荧光定量PCR方法,利用PCR技术扩增HSHRV-C1207 G蛋白的全长序列,构建重组质粒,作为荧光定量PCR的标准品,根据HSHRV-C1207 G蛋白的保守序列,设计合成了一对能特异性扩增143 bp片段的引物和TaqMan探针,以标准品为模板建立HSHRV的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,并对该方法的灵敏度、可重复性和特异性进行评价。结果显示:建立的荧光定量PCR检测方法标准曲线有较好的线性关系,相关系数(R2)为0.999,斜率为-3.290;荧光定量PCR最低可以检测到10个病毒核酸分子拷贝,...
【关键词】杂交鳢 弹状病毒 G蛋白 TaqMan real-time PCR 检测方法
【基金】国家科技支撑计划(2012BAD25B02); 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46)
【所属期刊栏目】水产学报
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