标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠

2014-05-28分类号:Q785

【作者】辛颖  张涛  张优优  张智英  
【部门】西北农林科技大学动物科技学院  陕西理工学院生物科学与工程学院  
【摘要】【目的】用慢病毒在体内感染精原干细胞,建立转基因动物生产技术平台。【方法】用三质粒慢病毒载体系统转染293T细胞包装慢病毒,转染后裂解细胞,收集携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒。将慢病毒液注射到小鼠曲细精管,获得F0代小鼠,制备小鼠睾丸组织切片,进行免疫双荧光检测。将F0代小鼠与野生型母鼠交配,获得F1代小鼠,PCR检测F1代是否为转基因小鼠。【结果】通过裂解细胞的方法成功制得慢病毒,将其注射到小鼠曲细精管,获得了10只F0代小鼠,经免疫双荧光检测,发现慢病毒可在活体上感染精原干细胞。8只F0代小鼠与野生型母鼠交配后共获得了41只F1代小鼠,经PCR检测,21只携带慢病毒基因片段,转基...
【关键词】慢病毒  活体  精原干细胞  转基因小鼠
【基金】国家“973”计划项目“iPS猪的规模化高效创建”(K301021001); 国家自然科学基金项目“人工锌指转录激活因子激活猪体细胞内源多能因子诱导iPS细胞的研究”(K305021104)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
文献传递